產(chǎn)品名稱：第一鏈cDNA合成試劑盒（去除gDNA）
英文名稱：1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA Purge)

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品描述：第一鏈 cDNA 合成試劑盒(去基因組)是以 mRNA 或者總RNA 為 模 板 ， 高 效 合 成 第 一 鏈 cDNA 。本試劑盒使 用Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶（Cat.No: HKE123），它的 RNase H 的活性與 AMV 反轉(zhuǎn)錄酶相比較低。該反轉(zhuǎn)錄酶可耐受 42～50°C 溫 度 。 試 劑 盒 中 含 有 重 組 RNA 酶抑制 （ Cat.No:HKE125），可耐受 55°C 高溫，有效 止 RNA 解。本制品含有去基因組成分 gDNA Purge，以 RNA 為模板進(jìn)行 cDNA 第一鏈合成時(shí)，可以同步去除基因組 DNA 污染，反應(yīng)結(jié)束后，70℃加熱 5 分鐘，就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶、RNA 酶抑制劑、gDNA Purge。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

環(huán)凱生物反轉(zhuǎn)錄酶無 RNase H 活性，可避免第一鏈 cDNA 合成過程中，RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA 降解，保證 cDNA 合成的質(zhì)量。

試劑盒中含去基因組成分，反轉(zhuǎn)錄時(shí)可同步去除基因組 DNA污染。

保存溫度：-20℃。

產(chǎn)品包裝：

注意事項(xiàng)：

1）用 DEPC 處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材，或購(gòu)買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí) 用具，實(shí) 過程戴手套并經(jīng)常更換手套，避免 RNA 酶的污染。

2）確保所用試劑中無 RNA 酶污染。

3）試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中，所有管子確?？蹏?yán)。

4）純化過的 RNA 必須保證不含有鹽，金屬離子，乙醇和本酚，以上成分會(huì)干擾第一鏈 cDNA 合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀 RNA 的方法去除掉痕量污染物。

5）為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效進(jìn)行，需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。

6）有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，本反轉(zhuǎn)錄酶可在 15 分鐘內(nèi)完成 1kb 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

操作方法：

常用PCR 循環(huán)：